DNase I (Rnase ഫ്രീ) (2u/ul)
പൂച്ച നമ്പർ: HC4007B
ഒറ്റ-അല്ലെങ്കിൽ ഇരട്ട-സ്ട്രാൻഡഡ് ഡിഎൻഎയെ ദഹിപ്പിക്കാൻ കഴിയുന്ന ഒരു എൻഡോ ന്യൂക്ലീസാണ് DNase I.5'-ഫോസ്ഫേറ്റ് ഗ്രൂപ്പും 3'-OH ഗ്രൂപ്പും അടങ്ങുന്ന മോണോ-ഒലിഗോഡോക്സിന്യൂക്ലിയോടൈഡുകൾ ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്നതിന് ഫോസ്ഫോഡിസ്റ്റർ ബോണ്ടുകളെ ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യാൻ ഇതിന് കഴിയും.DNase I-ൻ്റെ ഒപ്റ്റിമൽ പ്രവർത്തന pH ശ്രേണി 7-8 ആണ്.DNase I ൻ്റെ പ്രവർത്തനം Ca യെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു2+കൂടാതെ CO പോലുള്ള ഡൈവാലൻ്റ് ലോഹ അയോണുകൾ വഴി സജീവമാക്കാം2, എം.എൻ2+, Zn2+, മുതലായവ Mg സാന്നിധ്യത്തിൽ2+, DNase എനിക്ക് ഡബിൾ സ്ട്രാൻഡഡ് ഡിഎൻഎയുടെ ഏത് സൈറ്റും ക്രമരഹിതമായി പിളർത്താൻ കഴിയും;Mn യുടെ സാന്നിധ്യത്തിൽ ആയിരിക്കുമ്പോൾ2+, DNase എനിക്ക് ഒരേ സൈറ്റിൽ തന്നെ ഡിഎൻഎ രണ്ടായി പിളർത്താൻ കഴിയും, ഇത് 1-2 ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകൾ നീണ്ടുനിൽക്കുന്ന ബ്ലണ്ട് അറ്റങ്ങൾ അല്ലെങ്കിൽ ഒട്ടിപ്പിടിച്ച അറ്റങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കുന്നു.വിവിധ ആർഎൻഎ സാമ്പിളുകളുടെ സംസ്കരണത്തിന് ഇത് ഉപയോഗിക്കാം.
ഘടകങ്ങൾ
പേര് | 1KU | 5KU |
Recombinant DNaseI (RNase-free) | 500 μL | 5 × 500 μL |
DNase I റിയാക്ഷൻ ബഫർ (10×) | 1 മി.ലി | 5 × 1mL |
സംഭരണ വ്യവസ്ഥകൾ
ഈ ഉൽപ്പന്നം -25~-15℃ 2 വർഷത്തേക്ക് സൂക്ഷിക്കണം.ആവർത്തിച്ചുള്ള ഫ്രീസ്-ഥോ ഒഴിവാക്കുക.
നിർദ്ദേശങ്ങൾ
റഫറൻസിനായി മാത്രം RNA സാമ്പിളുകളിൽ നിന്ന് ഡിഎൻഎ നീക്കം ചെയ്യുന്നതിനായി പ്രയോഗിക്കുന്നു.
1. ഇനിപ്പറയുന്ന പ്രതികരണ സംവിധാനം തയ്യാറാക്കാൻ ദയവായി RNase-ഫ്രീ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബുകളും പൈപ്പറ്റ് ടിപ്പുകളും ഉപയോഗിക്കുക:
ഘടകങ്ങൾ | വോളിയം (μL) |
DNase I റിയാക്ഷൻ ബഫർ (10×) | 1 |
Recombinant DNasel (RNase-free) | 1 |
ആർ.എൻ.എ | X |
RNase-free ddH2O | 10 വരെ |
2. പ്രതികരണ സാഹചര്യങ്ങൾ ഇപ്രകാരമാണ്: 37℃, 15-30 മിനിറ്റിനു ശേഷം, 2.5 mM EDTA ലായനിയുടെ അന്തിമ സാന്ദ്രത ചേർത്ത് നന്നായി ഇളക്കുക, തുടർന്ന് 10 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 65℃.പ്രോസസ്സ് ചെയ്ത ടെംപ്ലേറ്റ് തുടർന്നുള്ള RT-PCR അല്ലെങ്കിൽ RT-qPCR പരീക്ഷണങ്ങൾ മുതലായവയ്ക്ക് ഉപയോഗിക്കാം.
കുറിപ്പുകൾ
1. DNase l ഫിസിക്കൽ ഡിനാറ്ററേഷനോട് സെൻസിറ്റീവ് ആണ്;മിക്സ് ചെയ്യുമ്പോൾ, ടെസ്റ്റ് ട്യൂബ് പതുക്കെ റിവേഴ്സ് ചെയ്യുകനന്നായി കുലുക്കുക, ശക്തിയായി കുലുക്കരുത്.
2. എൻസൈം ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ ഒരു ഐസ് ബോക്സിലോ ഐസ് ബാത്തിലോ സൂക്ഷിക്കണം, ഉപയോഗത്തിന് ശേഷം ഉടൻ തന്നെ -20 ഡിഗ്രിയിൽ സൂക്ഷിക്കണം.
3. ഈ ഉൽപ്പന്നം ഗവേഷണ ഉപയോഗത്തിന് മാത്രമുള്ളതാണ്.
4. നിങ്ങളുടെ സുരക്ഷയ്ക്കായി ലാബ് കോട്ടുകളും ഡിസ്പോസിബിൾ കയ്യുറകളും ഉപയോഗിച്ച് പ്രവർത്തിക്കുക.