വൈറൽ ഡിഎൻഎ/ആർഎൻഎ എക്സ്ട്രാക്ഷൻ കിറ്റ്
നാസോഫറിംഗിയൽ സ്വാബ്‌സ്, എൻവയോൺമെൻ്റൽ സ്വാബ്‌സ്, സെൽ കൾച്ചർ സൂപ്പർനാറ്റൻ്റുകൾ, ടിഷ്യൂ ഹോമോജെനേറ്റ് സൂപ്പർനാറ്റൻ്റുകൾ തുടങ്ങിയ സാമ്പിളുകളിൽ നിന്ന് ഉയർന്ന പ്യൂരിറ്റി വൈറൽ ഡിഎൻഎ/ആർഎൻഎ വേഗത്തിൽ വേർതിരിച്ചെടുക്കാൻ ഈ കിറ്റ് അനുയോജ്യമാണ്.ഉയർന്ന ഗുണമേന്മയുള്ള വൈറൽ ഡിഎൻഎ/ആർഎൻഎ എക്‌സ്‌ട്രാക്‌റ്റുചെയ്യുന്നതിന് ഫിനോൾ/ക്ലോറോഫോം ഓർഗാനിക് ലായകങ്ങളോ സമയമെടുക്കുന്ന ആൽക്കഹോൾ മഴയോ ഉപയോഗിക്കേണ്ടതിൻ്റെ ആവശ്യകത ഇല്ലാതാക്കുന്ന സിലിക്ക മെംബ്രൻ ശുദ്ധീകരണ സാങ്കേതികവിദ്യയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ് കിറ്റ്.ലഭിച്ച ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ മാലിന്യങ്ങളില്ലാത്തതും റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ, പിസിആർ, ആർടി-പിസിആർ, റിയൽ-ടൈം പിസിആർ, നെക്സ്റ്റ്-ജനറേഷൻ സീക്വൻസിങ് (എൻജിഎസ്), നോർത്തേൺ ബ്ലോട്ട് തുടങ്ങിയ ഡൗൺസ്ട്രീം പരീക്ഷണങ്ങളിൽ ഉപയോഗിക്കാനും തയ്യാറാണ്.
സംഭരണ വ്യവസ്ഥകൾ
15 ~ 25 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ സംഭരിക്കുക, ഊഷ്മാവിൽ കൊണ്ടുപോകുക
ഘടകങ്ങൾ
| ഘടകങ്ങൾ | 100RXNS |
| ബഫർ വി.എൽ | 50 മില്ലി |
| ബഫർ RW | 120 മില്ലി |
| RNase-free ddH2 O | 6 മില്ലി |
| FastPure RNA നിരകൾ | 100 |
| ശേഖരണ ട്യൂബുകൾ (2 മില്ലി) | 100 |
| RNase-രഹിത ശേഖരണ ട്യൂബുകൾ (1 .5ml) | 100 |
ബഫർ VL:ലിസിസിനും ബൈൻഡിംഗിനും ഒരു അന്തരീക്ഷം നൽകുക.
ബഫർ RW:ശേഷിക്കുന്ന പ്രോട്ടീനുകളും മറ്റ് മാലിന്യങ്ങളും നീക്കം ചെയ്യുക.
RNase-free ddH2O:സ്പിൻ കോളത്തിലെ മെംബ്രണിൽ നിന്ന് എലട്ട് ഡിഎൻഎ/ആർഎൻഎ.
FastPure RNA നിരകൾ:പ്രത്യേകമായി ഡിഎൻഎ/ആർഎൻഎയെ ആഗിരണം ചെയ്യുന്നു.
ശേഖരണ ട്യൂബുകൾ 2 മില്ലി:ഫിൽട്രേറ്റ് ശേഖരിക്കുക.
RNase-രഹിത ശേഖരണ ട്യൂബുകൾ 1.5 ml:ഡിഎൻഎ/ആർഎൻഎ ശേഖരിക്കുക.
അപേക്ഷകൾ
നാസോഫറിംഗൽ സ്വാബ്‌സ്, പാരിസ്ഥിതിക സ്വാബ്‌സ്, സെൽ കൾച്ചർ സൂപ്പർനാറ്റൻ്റുകൾ, ടിഷ്യു ഹോമോജെനേറ്റ് സൂപ്പർനറ്റൻ്റുകൾ.
സ്വയം തയ്യാറാക്കിയ മെറ്റീരിയൽials
RNase-സ്വതന്ത്ര പൈപ്പറ്റ് നുറുങ്ങുകൾ, 1.5 ml RNase-രഹിത സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബുകൾ, സെൻട്രിഫ്യൂജ്, വോർട്ടക്സ് മിക്സർ, പൈപ്പറ്റുകൾ.
പരീക്ഷണ പ്രക്രിയ
ഒരു ബയോ സേഫ്റ്റി കാബിനറ്റിൽ ഇനിപ്പറയുന്ന എല്ലാ ഘട്ടങ്ങളും നടപ്പിലാക്കുക.
1. RNase-രഹിത സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിലേക്ക് 200 μl സാമ്പിൾ ചേർക്കുക (അപര്യാപ്തമായ സാമ്പിൾ ആണെങ്കിൽ PBS അല്ലെങ്കിൽ 0.9% NaCl ഉപയോഗിച്ച് ഉണ്ടാക്കുക), 500 μl ബഫർ VL ചേർക്കുക, 15 - 30 സെക്കൻഡ് വോർട്ടക്സിംഗ് വഴി നന്നായി ഇളക്കുക, സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിൻ്റെ അടിയിൽ മിശ്രിതം ശേഖരിക്കാൻ ചുരുക്കത്തിൽ.
2. ഫാസ്റ്റ്‌പ്യുവർ ആർഎൻഎ കോളങ്ങൾ ഒരു ശേഖരണ ട്യൂബുകളിൽ 2 മില്ലി സ്ഥാപിക്കുക.മിശ്രിതം ഘട്ടം 1-ൽ നിന്ന് FastPure RNA നിരകളിലേക്ക് മാറ്റുക, 1 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 12,000 rpm (13,400 × g)-ൽ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുക, ഫിൽട്രേറ്റ് ഉപേക്ഷിക്കുക.
3. FastPure RNA നിരകളിലേക്ക് 600 μl ബഫർ RW ചേർക്കുക, 30 സെക്കൻ്റിനുള്ളിൽ 12,000 rpm (13,400 × g) സെൻട്രിഫ്യൂജ്, ഫിൽട്രേറ്റ് ഉപേക്ഷിക്കുക.
4. ഘട്ടം 3 ആവർത്തിക്കുക.
5. ശൂന്യമായ കോളം 2 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 12,000 ആർപിഎമ്മിൽ (13,400 × g) സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുക.
6. FastPure RNA കോളങ്ങൾ ഒരു പുതിയ RNase-സ്വതന്ത്ര ശേഖരണ ട്യൂബുകളിലേക്ക് 1.5 ml (കിറ്റിൽ നൽകിയിരിക്കുന്നു) ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം മാറ്റുക, കൂടാതെ 30 - 50 μl RNase-free ddH2O നിരയിൽ സ്പർശിക്കാതെ മെംബ്രണിൻ്റെ മധ്യഭാഗത്തേക്ക് ചേർക്കുക.ഊഷ്മാവിൽ 1 മിനിറ്റ് നിൽക്കാൻ അനുവദിക്കുക, 1 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 12,000 ആർപിഎമ്മിൽ (13,400 × ഗ്രാം) സെൻട്രിഫ്യൂജ്.
7. FastPure RNA നിരകൾ നിരസിക്കുക.ഡിഎൻഎ/ആർഎൻഎ നേരിട്ട് തുടർന്നുള്ള പരിശോധനകൾക്കായി ഉപയോഗിക്കാം, അല്ലെങ്കിൽ ഹ്രസ്വകാലത്തേക്ക് -30~ -15 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ അല്ലെങ്കിൽ കൂടുതൽ കാലയളവിലേക്ക് -85 ~-65 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ സൂക്ഷിക്കാം.
കുറിപ്പുകൾ
ഗവേഷണ ഉപയോഗത്തിന് മാത്രം.ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് നടപടിക്രമങ്ങളിൽ ഉപയോഗിക്കാനുള്ളതല്ല.
1. സാമ്പിളുകൾ മുൻകൂട്ടി ഊഷ്മാവിൽ സമനിലയിലാക്കുക.
2. വൈറസുകൾ വളരെ പകർച്ചവ്യാധിയാണ്.പരീക്ഷണത്തിന് മുമ്പ് ആവശ്യമായ എല്ലാ സുരക്ഷാ മുൻകരുതലുകളും സ്വീകരിച്ചിട്ടുണ്ടെന്ന് ഉറപ്പാക്കുക.
3. സാമ്പിൾ ആവർത്തിച്ച് മരവിപ്പിക്കുന്നതും ഉരുകുന്നതും ഒഴിവാക്കുക, കാരണം ഇത് വേർതിരിച്ചെടുത്ത വൈറൽ ഡിഎൻഎ/ആർഎൻഎയുടെ അപചയത്തിനോ വിളവ് കുറയുന്നതിനോ ഇടയാക്കിയേക്കാം.
4. സ്വയം തയ്യാറാക്കിയ ഉപകരണങ്ങളിൽ RNase-സ്വതന്ത്ര പൈപ്പറ്റ് നുറുങ്ങുകൾ, 1.5 ml RNase-ഫ്രീ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബുകൾ, സെൻട്രിഫ്യൂജ്, വോർട്ടക്സ് മിക്സർ, പൈപ്പറ്റുകൾ എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു.
5. കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ, ലാബ് കോട്ട്, ഡിസ്പോസിബിൾ ലാറ്റക്സ് കയ്യുറകൾ, ഡിസ്പോസിബിൾ മാസ്ക് എന്നിവ ധരിക്കുക, RNase മലിനീകരണ സാധ്യത കുറയ്ക്കുന്നതിന് RNase-രഹിത ഉപഭോഗവസ്തുക്കൾ ഉപയോഗിക്കുക.
6. വ്യക്തമാക്കിയിട്ടില്ലെങ്കിൽ എല്ലാ ഘട്ടങ്ങളും റൂം താപനിലയിൽ നടത്തുക.
മെക്കാനിസം & വർക്ക്ഫ്ലോ
