മൾട്ടിപ്ലക്സ് qPCR പ്രോബ് പ്രിമിക്സ്
പൂച്ച നമ്പർ: HCB5051A
TaqMan മൾട്ടിപ്ലക്സ് qPCR മാസ്റ്റർ മിക്സ് (ഡൈ ബേസ്ഡ്) 2 × തത്സമയ ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് PCR ആംപ്ലിഫിക്കേഷനുള്ള ഒരു പ്രീ-സൊല്യൂഷനാണ്, ഉയർന്ന സെൻസിറ്റിവിറ്റിയും പ്രത്യേകതയും ഉള്ളതാണ്, ഇത് നീല നിറമുള്ളതും സാമ്പിൾ കൂട്ടിച്ചേർക്കലിൻ്റെ ഫലവുമുള്ളതുമാണ്.ഈ ഉൽപ്പന്നം 2× മിക്സ് പ്രീ-മിക്‌സ്ഡ് റീജൻ്റ് ആണ്, ഇത് ഒരു പ്രതികരണത്തിൽ നാല് ഫ്ലൂറസെൻ്റ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് പിസിആർ പ്രതികരണങ്ങൾ വരെ സാധ്യമാക്കുന്നു.ഈ ഉൽപ്പന്നത്തിൽ ഹോട്ട്-സ്റ്റാർട്ട് ടാക്ക് എൻസൈമിലേക്കുള്ള ജനിതകമാറ്റം വരുത്തിയ ആൻ്റിബോഡി രീതി അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, ഇത് ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ സെൻസിറ്റിവിറ്റിയും പ്രത്യേകതയും വളരെയധികം മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നു.അതേ സമയം, ഈ ഉൽപ്പന്നം മൾട്ടി-റിയാക്ഷൻ ബഫറിനെ ആഴത്തിൽ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്തിട്ടുണ്ട്, ഇത് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കാര്യക്ഷമത മെച്ചപ്പെടുത്താനും കുറഞ്ഞ സാന്ദ്രതയുള്ള ടെംപ്ലേറ്റുകളുടെ ഫലപ്രദമായ ആംപ്ലിഫിക്കേഷനെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കാനും കഴിയും.ഈ ഉൽപ്പന്നം ജനിതകമാറ്റത്തിനും മൾട്ടിപ്ലക്സ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് വിശകലനത്തിനും ഉപയോഗിക്കാം.
സ്പെസിഫിക്കേഷൻ
| ചൂടുള്ള തുടക്കം | ബിൽറ്റ്-ഇൻ ഹോട്ട് സ്റ്റാർട്ട് |
| കണ്ടെത്തൽ രീതി | പ്രൈമർ-പ്രോബ് കണ്ടെത്തൽ |
| PCR രീതി | qPCR |
| പോളിമറേസ് | ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് |
| സാമ്പിൾ തരം | ഡിഎൻഎ |
സംഭരണ വ്യവസ്ഥകൾ
ഡ്രൈ ഐസ് ഉപയോഗിച്ചാണ് ഉൽപ്പന്നം കയറ്റി അയക്കുന്നത്, 2 വർഷത്തേക്ക് -25~-15℃ വരെ സൂക്ഷിക്കാം.
നിർദ്ദേശങ്ങൾ
1. പ്രതികരണംസിസ്റ്റം
| ഘടകങ്ങൾ | വോളിയം (μL) | അന്തിമ ഏകാഗ്രത |
| 2× TaqMan മൾട്ടിപ്ലക്സ് qPCR മാസ്റ്റർ മിക്സ് | 12.5 | 1× |
| പ്രൈമർ മിക്സ് (10 μmol/L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| പ്രോബ് മിക്സ് (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| റോക്സ് റഫറൻസ് ഡൈ | 0.5 | 1× |
| ടെംപ്ലേറ്റ് DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | 25 വരെ | - |
കുറിപ്പുകൾ:ശക്തമായ കുലുക്കത്തിൽ നിന്ന് അമിതമായ കുമിളകൾ ഒഴിവാക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് നന്നായി ഇളക്കുക.
എ.പ്രൈമർ കോൺസൺട്രേഷൻ: പ്രൈമർ മിക്സിൽ ഒന്നിലധികം ജോഡി പ്രൈമറുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, സാധാരണയായി ഓരോ പ്രൈമറിലും അന്തിമ സാന്ദ്രത 0.2 μmol/L ആണ്, കൂടാതെ 0.1 നും 0.5 μmol/L നും ഇടയിൽ ഉചിതമായ രീതിയിൽ ക്രമീകരിക്കാനും കഴിയും.
ബി.പ്രോബ് കോൺസൺട്രേഷൻ: പ്രോബ് മിക്സിൽ വ്യത്യസ്ത ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നലുകളുള്ള ഒന്നിലധികം പ്രോബുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, കൂടാതെ ഓരോ പ്രോബിൻ്റെയും കോൺസൺട്രേഷൻ പ്രത്യേക സാഹചര്യത്തിനനുസരിച്ച് 50 മുതൽ 250 nmol/L വരെ ക്രമീകരിക്കാം.
1.റോക്സ് ഡൈ റഫറൻസ്: കിണറുകൾക്കിടയിൽ ഉണ്ടാകുന്ന ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നലിൻ്റെ പിശക് ശരിയാക്കാൻ, അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ് പോലുള്ള തത്സമയ PCR ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉപകരണത്തിൽ ഇത് ഉപയോഗിക്കുന്നു;ഈ ഉൽപ്പന്നത്തിൽ റോക്സ് ഡൈ റഫറൻസ് അടങ്ങിയിട്ടില്ല.ആവശ്യമെങ്കിൽ Cas#10200 ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
2.ടെംപ്ലേറ്റ് ഡൈല്യൂഷൻ: qPCR വളരെ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്, കൂടാതെ ഉപയോഗത്തിനായി ടെംപ്ലേറ്റ് നേർപ്പിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.ടെംപ്ലേറ്റ് ഒരു cDNA സ്റ്റോക്ക് സൊല്യൂഷനാണെങ്കിൽ, ടെംപ്ലേറ്റ് വോളിയം മൊത്തം വോളിയത്തിൻ്റെ 1/10 കവിയാൻ പാടില്ല.
3.പ്രതികരണ സംവിധാനം: ടാർഗെറ്റ് ജീൻ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ്റെ ഫലപ്രാപ്തിയും ആവർത്തനക്ഷമതയും ഉറപ്പാക്കാൻ 25μL,30μL അല്ലെങ്കിൽ 50 μL ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
4.സിസ്റ്റം തയ്യാറാക്കൽ: സൂപ്പർ ക്ലീൻ ബെഞ്ചിൽ തയ്യാറാക്കുക, ന്യൂക്ലീസ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ ഇല്ലാതെ നുറുങ്ങുകളും പ്രതികരണ ട്യൂബുകളും ഉപയോഗിക്കുക;ഫിൽട്ടർ കാട്രിഡ്ജുകൾ ഉപയോഗിച്ച് നുറുങ്ങുകൾ ഉപയോഗിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.ക്രോസ് മലിനീകരണവും എയറോസോൾ മലിനീകരണവും ഒഴിവാക്കുക.
2.പ്രതികരണ പരിപാടി
| സൈക്കിൾ ഘട്ടം | താൽക്കാലികം. | സമയം | സൈക്കിളുകൾ |
| പ്രാരംഭ-ഡീനാറ്ററേഷൻ | 95 ℃ | 5 മിനിറ്റ് | 1 |
| ഡീനാറ്ററേഷൻ | 95 ℃ | 15 സെക്കൻഡ് | 45 |
| അനീലിംഗ് / എക്സ്റ്റൻഷൻ | 60 ℃ | 30 സെക്കൻഡ് |
കുറിപ്പുകൾ:
1.അനീലിംഗ്/വിപുലീകരണം: രൂപകൽപ്പന ചെയ്ത പ്രൈമർ Tm മൂല്യം അനുസരിച്ച് താപനിലയും സമയവും ഉചിതമായി ക്രമീകരിക്കാവുന്നതാണ്.
2.ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നൽ ഏറ്റെടുക്കൽ: വ്യത്യസ്ത qPCR കണ്ടെത്തൽ ഉപകരണങ്ങൾക്ക് ആവശ്യമായ ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നൽ ഏറ്റെടുക്കൽ സമയം വ്യത്യസ്‌തമാണ്, ദയവായി ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ സമയ പരിധി അനുസരിച്ച് സജ്ജമാക്കുക.നിരവധി സാധാരണ ഉപകരണങ്ങളുടെ സമയം ഇനിപ്പറയുന്ന രീതിയിൽ സജ്ജീകരിച്ചിരിക്കുന്നു:
20 സെക്കൻ്റ്: അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ് 7700, 7900HT, 7500 ഫാസ്റ്റ്
31 സെക്കൻഡ്: അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ് 7300
32 സെക്കൻഡ്: അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ് 7500
കുറിപ്പുകൾ
നിങ്ങളുടെ ആരോഗ്യവും സുരക്ഷയും ഉറപ്പാക്കാൻ ആവശ്യമായ പിപിഇ, അത്തരം ലാബ് കോട്ടും കയ്യുറകളും ധരിക്കുക!
