2×സെൻസി ഡയറക്‌ട് പ്രീമിക്‌സ്-യുഎൻജി (പ്രോബ് qPCR)

പൂച്ച നമ്പർ: HCB5151A

സെൻസിഡയറക്ട് പ്രിമിക്‌സ്-യുഎൻജി (പ്രോബ് ക്യുപിസിആർ) രൂപകൽപ്പന ചെയ്‌തിരിക്കുന്നത് ഡിഎൻഎ എക്‌സ്‌ട്രാക്ഷൻ അല്ലെങ്കിൽ സാമ്പിൾ തയ്യാറാക്കാതെ സാമ്പിളുകളിൽ നിന്ന് നേരിട്ട് പിസിആർ നടത്താൻ വേണ്ടിയാണ്.ഈ റിയാജൻ്റിൽ ഹോട്ട്-സ്റ്റാർട്ട് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ്, യുറാസിൽ ഡിഎൻഎ ഗ്ലൈക്കോസൈലേസ് (യുഎൻജി), ആർനേസ് ഇൻഹിബിറ്റർ, എംജിസിഎൽ എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.₂, dNTP-കൾ (dTTP-ക്ക് പകരം dUTP), കൂടാതെ ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് PCR-ന് (qPCR) സ്റ്റെബിലൈസറുകൾ.ഈ റിയാജൻ്റ് ഉയർന്ന ഇൻഹിബിറ്റർ-ടോളറൻസ് രൂപപ്പെടുത്തുന്നു, അതിനാൽ തൊണ്ടയിലെ സ്വാബ്, ഉമിനീർ, ആൻ്റി-കോഗുലേറ്റഡ് ഹോൾ ബ്ലഡ്, പ്ലാസ്മ, സെറം തുടങ്ങിയ സാമ്പിളുകൾ ഡിഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കാതെ നേരിട്ട് കണ്ടെത്തുന്നതിന് ഇത് പ്രയോഗിക്കാവുന്നതാണ്.ആൻ്റി-ഇൻഹിബിറ്ററി ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ്, യുഎൻജി എൻസൈം എന്നിവയുടെ മിക്സഡ് എൻസൈമുകളുള്ള ക്യുപിസിആറിനായി റീജൻ്റ് പ്രൊപ്രൈറ്ററി ബഫർ ഉപയോഗിക്കുന്നു.അതിനാൽ, ഇതിന് ഇൻഹിബിറ്ററുകൾ അടങ്ങിയ സാമ്പിളുകളിൽ ടാർഗെറ്റ് ജീനുകളുടെ നല്ല ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ നേടാനും പിസിആർ അവശിഷ്ടങ്ങളും എയറോസോൾ മലിനീകരണവും മൂലമുണ്ടാകുന്ന തെറ്റായ പോസിറ്റീവ് ആംപ്ലിഫിക്കേഷനെ തടയാനും കഴിയും.അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ്, എപ്പൻഡോർഫ്, ബയോ-റാഡ്, റോച്ചെ തുടങ്ങിയ മിക്ക ഫ്ലൂറസെൻ്റ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് പിസിആർ ഉപകരണങ്ങളുമായി ഈ റിയാജൻറ് പൊരുത്തപ്പെടുന്നു.

ഘടകങ്ങൾ

1. 50×SensiDirect എൻസൈം/UNG മിക്സ്

2. 2×SensiDirect Premix ബഫർ (dUTP)

സംഭരണ ​​വ്യവസ്ഥകൾ

എല്ലാ ഘടകങ്ങളും ദീർഘകാല സംഭരണത്തിനായി -20 ഡിഗ്രിയിലും 3 മാസം വരെ 4 ഡിഗ്രിയിലും സൂക്ഷിക്കണം.ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് മുമ്പ്, ഉരുകിയ ശേഷം നന്നായി മിക്സ് ചെയ്യുക, സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുക.ഇടയ്ക്കിടെ ഫ്രീസ്-ഥോവ് ഒഴിവാക്കുക.

സൈക്ലിംഗ് പ്രോട്ടോക്കോൾ

പൈപ്പിംഗ് നിർദ്ദേശങ്ങൾ

1. പ്രൈമറിൻ്റെ അന്തിമ സാന്ദ്രത സാധാരണയായി 0.2μM ആണ്.മികച്ച ഫലങ്ങൾക്കായി, പ്രൈമർ കോൺസൺട്രേഷൻ 0.2-1μM പരിധിക്കുള്ളിൽ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യാം.

2. സാധാരണയായി, പ്രോബ് കോൺസൺട്രേഷൻ 0.1-0.3μM പരിധിക്കുള്ളിൽ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യാൻ കഴിയും.പ്രോബിൻ്റെ ഒപ്റ്റിമൽ കോൺസൺട്രേഷൻ തത്സമയ പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉപകരണം, പ്രോബിൻ്റെ തരം, ഫ്ലൂറസെൻ്റ് ലേബലിംഗ് പദാർത്ഥത്തിൻ്റെ തരം എന്നിവയുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു.ഇൻസ്ട്രുമെൻ്റ് മാനുവൽ അല്ലെങ്കിൽ ഓരോ ഫ്ലൂറസെൻ്റ് പ്രോബിൻ്റെയും നിർദ്ദിഷ്ട ആവശ്യകതകൾ പരിശോധിക്കുക.

3. വ്യത്യസ്ത തരം സാമ്പിളുകളിൽ വ്യത്യസ്ത തരങ്ങളും ഇൻഹിബിറ്ററിൻ്റെ ഉള്ളടക്കവും ടാർഗെറ്റ് ജീനിൻ്റെ കോപ്പി നമ്പറും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.സാമ്പിൾ വോളിയം യഥാർത്ഥ അവസ്ഥ അനുസരിച്ച് പരിഗണിക്കണം.ആവശ്യമെങ്കിൽ ന്യൂക്ലീസ്-ഫ്രീ വാട്ടർ അല്ലെങ്കിൽ TE ബഫർ ചേർത്ത് സാമ്പിൾ നേർപ്പിക്കുക.

4. വ്യത്യസ്ത സാമ്പിളുകളുടെ ശുപാർശിത അളവ്:

ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണം

1. ഫംഗ്‌ഷൻ കണ്ടെത്തൽ: qPCR-ൻ്റെ സംവേദനക്ഷമത, പ്രത്യേകത, ആവർത്തനക്ഷമത.

2. എക്സോജനസ് ന്യൂക്ലീസ് പ്രവർത്തനമില്ല: എക്സോജനസ് എൻഡോ ന്യൂക്ലീസും എക്സോന്യൂക്ലീസും മലിനീകരണമില്ല.

ഉൽപ്പന്നത്തിൻ്റെ കുറിപ്പുകൾ

1. ഈ ഉൽപ്പന്നം പുതിയ തരം ഹോട്ട്-സ്റ്റാർട്ട് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് ഉപയോഗിക്കുന്നു, അത് 1-5 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ സജീവമാക്കാം. അതിൻ്റെ പ്രതികരണ ബഫർ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്തിരിക്കുന്നതിനാൽ, പ്രോബ് രീതി ഉപയോഗിച്ച് ഇരട്ട അല്ലെങ്കിൽ ഒന്നിലധികം ഫ്ലൂറസെൻസ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് PCR-ന് ഇത് കൂടുതൽ അനുയോജ്യമാണ്.

2. PCR ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ്റെ Rn മൂല്യം വളരെ കുറവാണെങ്കിൽ അല്ലെങ്കിൽ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ വ്യക്തമായി തടഞ്ഞാൽ, സാമ്പിൾ തുക കുറയ്ക്കുക, പ്രതികരണത്തിൻ്റെ അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുക അല്ലെങ്കിൽ സാമ്പിളിൻ്റെ മുൻ നേർപ്പിക്കൽ ഫലങ്ങൾ മെച്ചപ്പെടുത്തിയേക്കാം.

3. രക്തം, ഉമിനീർ, മൂത്രം, തൊണ്ടയിലെ സ്വാബ് മുതലായവയുടെ ശേഖരണം ക്ലിനിക്കൽ മാനദണ്ഡങ്ങൾ പാലിക്കേണ്ടതാണ്, കൂടാതെ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ഡീഗ്രേഡേഷൻ തടയാൻ പുതിയ സാമ്പിൾ ഉപയോഗിക്കാം.

4. വ്യത്യസ്‌ത ആംപ്ലിക്കോണുകൾക്ക് dUTP-യിലേക്കുള്ള വ്യത്യസ്ത ഉപയോഗക്ഷമതയും UNG-യോടുള്ള സംവേദനക്ഷമതയും ഉള്ളതിനാൽ, UNG സിസ്റ്റം ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ കണ്ടെത്തൽ സംവേദനക്ഷമത കുറയുകയാണെങ്കിൽ റിയാഗൻ്റുകൾ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്യണം.ആവശ്യമെങ്കിൽ സാങ്കേതിക പിന്തുണയ്‌ക്കായി ഞങ്ങളെ ബന്ധപ്പെടുക.

5. ഒറ്റ-ഘട്ട പ്രതികരണങ്ങൾക്കിടയിൽ കാരിഓവർ പിസിആർ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഒഴിവാക്കാൻ, ആംപ്ലിഫിക്കേഷനായി സമർപ്പിത പരീക്ഷണ മേഖലയും പൈപ്പറ്റും ആവശ്യമാണ്.കയ്യുറകൾ ഉപയോഗിച്ച് പ്രവർത്തിക്കുകയും ഇടയ്ക്കിടെ മാറ്റുകയും ചെയ്യുക, പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷന് ശേഷം പ്രതികരണ ട്യൂബ് തുറക്കരുത്.