അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ് GMP-ഗ്രേഡ്
പൂച്ച നമ്പർ: HC2016A
അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ് ജിഎംപി-ഗ്രേഡ് എസ്ഷെറിച്ചിയ കോളിയിൽ (ഇ.കോളി) പ്രകടിപ്പിക്കുകയും ശുദ്ധീകരിക്കുകയും ചെയ്യുന്നത് ജനിതകമായി എഞ്ചിനീയറിംഗ് ചെയ്ത് ജിഎംപി പരിതസ്ഥിതിയിൽ തയ്യാറാക്കിയതാണ്.ശാസ്ത്രീയ ഗവേഷണത്തിൽ സെൽ സൂപ്പർനാറ്റൻ്റിൻ്റെയും സെൽ ലൈസേറ്റിൻ്റെയും വിസ്കോസിറ്റി കുറയ്ക്കാനും പ്രോട്ടീൻ ശുദ്ധീകരണ കാര്യക്ഷമത വർദ്ധിപ്പിക്കാനും പ്രോട്ടീൻ പ്രവർത്തന ഗവേഷണം വർദ്ധിപ്പിക്കാനും ഇതിന് കഴിയും.വൈറസ് ശുദ്ധീകരണം, വാക്സിൻ നിർമ്മാണം, പ്രോട്ടീൻ/പോളിസാക്കറൈഡ് ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ നിർമ്മാണം എന്നിവയുൾപ്പെടെയുള്ള ആപ്ലിക്കേഷനുകളുടെ ബയോളജിക്കൽ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ പ്രകടനവും സുരക്ഷയും മെച്ചപ്പെടുത്താനും, ആതിഥേയ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങളെ pg-ഗ്രേഡിലേക്ക് കുറയ്ക്കാനും ഉൽപ്പന്നത്തിന് കഴിയും.കൂടാതെ, സെൽ തെറാപ്പിയിലും വാക്സിൻ വികസനത്തിലും ഹ്യൂമൻ പെരിഫറൽ ബ്ലഡ് മോണോ ന്യൂക്ലിയർ സെല്ലുകളുടെ (പിബിഎംസി) കട്ടപിടിക്കുന്നത് തടയാനും ഉൽപ്പന്നം പ്രയോഗിക്കാവുന്നതാണ്.
അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ് ഒരു അണുവിമുക്തമായ റിയാജൻ്റെ രൂപത്തിലാണ് നൽകിയിരിക്കുന്നത്, ബഫറിൽ (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% ഗ്ലിസറിൻ), നിറമില്ലാത്തതും സുതാര്യവുമായ ദ്രാവകത്തിൻ്റെ രൂപഭാവത്തോടെ.ഈ ഉൽപ്പന്നം ജിഎംപി പ്രോസസ് ആവശ്യകതകളാൽ നിർമ്മിക്കപ്പെടുകയും ഒരു ദ്രാവക രൂപത്തിൽ നൽകുകയും ചെയ്യുന്നു.
ഘടകങ്ങൾ
അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ് GMP-ഗ്രേഡ് (250 U/μL)
സംഭരണ വ്യവസ്ഥകൾ
ഡ്രൈ ഐസ് ഉപയോഗിച്ചാണ് ഉൽപ്പന്നം അയയ്ക്കുന്നത്, രണ്ട് വർഷത്തേക്ക് -25℃~-15°C യിൽ സൂക്ഷിക്കാം.
ഉൽപ്പന്നം തുറന്ന് ഒരാഴ്ചയിൽ കൂടുതൽ 4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ സൂക്ഷിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, ഫിൽട്ടർ ചെയ്യാൻ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നുസൂക്ഷ്മജീവികളുടെ മലിനീകരണം തടയുന്നതിനുള്ള ഉൽപ്പന്നം.
സ്പെസിഫിക്കേഷനുകൾ
| എക്സ്പ്രഷൻ ഹോസ്റ്റ് | അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ് ജീനുമായുള്ള പുനഃസംയോജന ഇ |
| തന്മാത്രാ ഭാരം | 26.5 kDa |
| സോഇലക്ട്രിക് പോയിൻ്റ് | 6.85 |
| ശുദ്ധി | ≥99% (SDS-പേജ്) |
| സ്റ്റോറേജ് ബഫർ | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% ഗ്ലിസറിൻ |
|
യൂണിറ്റ് നിർവ്വചനം | ഒരു പ്രവർത്തന യൂണിറ്റിൻ്റെ (U) നിർവചനം ഉപയോഗിക്കുന്ന എൻസൈമിൻ്റെ അളവാണ്2. 625 മില്ലിയിൽ 30 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ ΔA260 ൻ്റെ ആഗിരണം മൂല്യം 1.0 മാറ്റുക8.0 pH ഉള്ള 37℃ പ്രതികരണ സംവിധാനം (പൂർണ്ണമായ ദഹനത്തിന് തുല്യമാണ്37 μg സാൽമൺ ബീജം ഡിഎൻഎ ഒലിഗോ ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകളാക്കി). |
നിർദ്ദേശങ്ങൾ
1. സാമ്പിൾ സമാഹാരം
അനുബന്ധ സെല്ലുകൾ: മീഡിയം നീക്കം ചെയ്യുക, പിബിഎസ് ഉപയോഗിച്ച് സെല്ലുകൾ കഴുകുക, സൂപ്പർനാറ്റൻ്റ് നീക്കം ചെയ്യുക.
സസ്പെൻഷൻ സെല്ലുകൾ: സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷൻ വഴി സെല്ലുകൾ ശേഖരിക്കുക, സെല്ലുകൾ PBS ഉപയോഗിച്ച് കഴുകുക, 6,000-ൽ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുക10 മിനിറ്റ് rpm, പെല്ലറ്റ് ശേഖരിക്കുക.
കോളി: സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷൻ വഴി ബാക്ടീരിയകൾ ശേഖരിക്കുക, പിബിഎസ് ഉപയോഗിച്ച് ഒരിക്കൽ കഴുകുക, 8,000-ൽ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുക5 മിനിറ്റ് rpm, പെല്ലറ്റ് ശേഖരിക്കുക.
2. മാതൃകാ ചികിത്സ
ശേഖരിച്ച സെൽ പെല്ലറ്റുകളെ പിണ്ഡം(g) വോളിയം(mL)1:(10-20) അനുപാതത്തിൽ ലിസിസ് ബഫർ ഉപയോഗിച്ച് കൈകാര്യം ചെയ്യുക, അല്ലെങ്കിൽ മെക്കാനിക്കൽ അല്ലെങ്കിൽ കെമിക്കൽ രീതികളിലൂടെ ഐസ് അല്ലെങ്കിൽ റൂം താപനിലയിൽ (1g സെൽ പെല്ലറ്റിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.
109 സെല്ലുകൾ).
3. എൻസൈം ചികിത്സ
പ്രതികരണ സംവിധാനത്തിലേക്ക് 1-5mM MgCl ചേർക്കുക, pH 8-9 ആയി ക്രമീകരിക്കുക.
1 ഗ്രാം സെൽ ഉരുളകളെ ദഹിപ്പിക്കാൻ 250 യൂണിറ്റുകളുടെ അനുപാതം അനുസരിച്ച് അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ് ചേർക്കുക, 30 മിനിറ്റിലധികം നേരം 37 ഡിഗ്രിയിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുക.തിരഞ്ഞെടുക്കാൻ "ശുപാർശ ചെയ്ത പ്രതികരണ സമയം" ഫോം പരിശോധിക്കുകചികിത്സയുടെ കാലാവധി.
4. സൂപ്പർനാറ്റൻ്റ് സമാഹാരം
30 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 12,000 ആർപിഎമ്മിൽ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്ത് സൂപ്പർനാറ്റൻ്റ് ശേഖരിക്കുക.
ശ്രദ്ധിക്കുക: ലായനി അമ്ലമോ ക്ഷാരമോ ആണെങ്കിൽ, അല്ലെങ്കിൽ ഉയർന്ന അളവിൽ ഉപ്പ്, ഡിറ്റർജൻ്റുകൾ അല്ലെങ്കിൽdenaturants, ദയവായി എൻസൈം ഡോസ് വർദ്ധിപ്പിക്കുക അല്ലെങ്കിൽ അതിനനുസരിച്ച് ചികിത്സ സമയം നീട്ടുക.
ശുപാർശ ചെയ്യുന്ന പ്രതികരണ അവസ്ഥഓൺസ്
| പരാമീറ്റർ | ഒപ്റ്റിമൽ അവസ്ഥ | ഫലപ്രദമായ കണ്ടീഷൻ |
| Mg²+ ഏകാഗ്രത | 1-5 മി.മീ | 1-10 മി.മീ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| താപനില | 37℃ | 0-42℃ |
| ഡിടിടി ഏകാഗ്രത | 0-100 എംഎം | >0 എംഎം |
| മെർകാപ്റ്റോത്തനോൾ സാന്ദ്രത | 0-100 എംഎം | >0 എംഎം |
| മോണോവാലൻ്റ് കാറ്റേഷൻ കോൺസൺട്രേഷൻ | 0-20 മി.മീ | 0-150 മി.മീ |
| ഫോസ്ഫേറ്റ് ലോൺ കോൺസൺട്രേഷൻ | 0-10 മി.മീ | 0-100 എംഎം |
ശുപാർശ ചെയ്ത പ്രതികരണം സമയം (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ് അളവ് (അവസാന ഏകാഗ്രത) | പ്രതികരണ സമയം |
| 0.25 U/mL | >10 മണിക്കൂർ |
| 2.5 U/mL | >4 മണിക്കൂർ |
| 25 U/mL | 30 മിനിറ്റ് |
കുറിപ്പുകൾ:
നിങ്ങളുടെ ആരോഗ്യവും സുരക്ഷയും ഉറപ്പാക്കാൻ ആവശ്യമായ പിപിഇ, അത്തരം ലാബ് കോട്ടും കയ്യുറകളും ധരിക്കുക!
