ർനാസ് എ

ഏകദേശം 13.7 kDa തന്മാത്രാ ഭാരമുള്ള 4 ഡൈസൾഫൈഡ് ബോണ്ടുകൾ അടങ്ങുന്ന ഒറ്റ-ധാരാ പോളിപെപ്റ്റൈഡാണ് Ribonuclease A(RNaseA).RNase A എന്നത് ഒരു എൻഡോറിബോ ന്യൂക്ലീസ് ആണ്, ഇത് C, U അവശിഷ്ടങ്ങളിൽ ഒറ്റ-ധാരയുള്ള ആർഎൻഎയെ പ്രത്യേകമായി തരംതാഴ്ത്തുന്നു.പ്രത്യേകമായി, ഒരു ന്യൂക്ലിയോടൈഡിൻ്റെ 5'-റൈബോസും തൊട്ടടുത്തുള്ള പിരിമിഡൈൻ ന്യൂക്ലിയോടൈഡിൻ്റെ 3'-റൈബോസിലെ ഫോസ്ഫേറ്റ് ഗ്രൂപ്പും ചേർന്ന് രൂപംകൊണ്ട ഫോസ്ഫോഡിസ്റ്റർ ബോണ്ടിനെ പിളർപ്പ് തിരിച്ചറിയുന്നു, അങ്ങനെ 2,3'-സൈക്ലിക് ഫോസ്ഫേറ്റുകൾ ബന്ധപ്പെട്ട 3-ലേക്ക് ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യപ്പെടുന്നു. 'ന്യൂക്ലിയോസൈഡ് ഫോസ്ഫേറ്റുകൾ (ഉദാ, pG-pG-pC-pA-pG pG-pG-pCp, A-PG എന്നിവ സൃഷ്ടിക്കാൻ RNase A വഴി പിളർന്നിരിക്കുന്നു).RNase A ആണ് സിംഗിൾ-സ്ട്രാൻഡഡ് RNA പിളർത്തുന്നതിൽ ഏറ്റവും സജീവമായത്.ശുപാർശ ചെയ്യുന്ന പ്രവർത്തന സാന്ദ്രത 1- 100 μG/mL ആണ്, വിവിധ പ്രതികരണ സംവിധാനങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു.കുറഞ്ഞ ഉപ്പ് സാന്ദ്രത (0-100 mM NaCl) RNA-DNA ഹൈബ്രിഡൈസേഷൻ വഴി രൂപംകൊണ്ട ഒറ്റ-ധാരയുള്ള RNA, ഇരട്ട-ധാരയുള്ള RNA, RNA ശൃംഖലകൾ മുറിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കാം.

എന്നിരുന്നാലും, ഉയർന്ന ലവണസാന്ദ്രതയിൽ (≥0.3 M), RNase A പ്രത്യേകമായി ഒറ്റ സ്ട്രോണ്ടഡ് ആർഎൻഎയെ മാത്രം പിളർത്തുന്നു.

പ്ലാസ്മിഡ് ഡിഎൻഎ അല്ലെങ്കിൽ ജീനോമിക് ഡിഎൻഎ തയ്യാറാക്കുമ്പോൾ ആർഎൻഎ നീക്കം ചെയ്യാൻ ആർഎൻഎസെ എ ഏറ്റവും സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.തയ്യാറാക്കൽ പ്രക്രിയയിൽ DNase സജീവമാണോ അല്ലയോ എന്നത് പ്രതികരണത്തെ എളുപ്പത്തിൽ ബാധിക്കും.ഒരു വാട്ടർ ബാത്തിൽ തിളപ്പിക്കുന്ന പരമ്പരാഗത രീതി DNase പ്രവർത്തനം നിർജ്ജീവമാക്കാൻ ഉപയോഗിക്കാം.ഈ ഉൽപ്പന്നത്തിൽ DNase, പ്രോട്ടീസ് എന്നിവ അടങ്ങിയിട്ടില്ല, കൂടാതെ ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് ചൂട് ചികിത്സ ആവശ്യമില്ല.കൂടാതെ, RNase പ്രൊട്ടക്ഷൻ അനാലിസിസ്, RNA സീക്വൻസ് അനാലിസിസ് തുടങ്ങിയ മോളിക്യുലാർ ബയോളജി പരീക്ഷണങ്ങളിലും ഈ ഉൽപ്പന്നം ഉപയോഗിക്കാം.