സാമ്പിൾ റിലീസ് റീജൻ്റ്
മോളിക്യുലാർ POCT ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സാഹചര്യങ്ങൾക്കുള്ളതാണ് സാമ്പിൾ റിലീസ് റീജൻ്റ്.നേരിട്ടുള്ള ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ LAMP, നേരിട്ടുള്ള ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ PCR എന്നീ രണ്ട് സിസ്റ്റങ്ങൾക്ക്, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ ആവശ്യമില്ല.സാമ്പിളിൻ്റെ ക്രൂഡ് ലൈസേറ്റ് നേരിട്ട് വർദ്ധിപ്പിക്കാനും ടാർഗെറ്റ് ജീൻ കൃത്യമായി കണ്ടെത്താനും സാമ്പിൾ കണ്ടെത്തൽ സമയം കൂടുതൽ ചുരുക്കാനും കഴിയും, ഇത് മോളിക്യുലാർ POCT യുടെ ആപ്ലിക്കേഷൻ ആവശ്യകതകളുമായി തികച്ചും പൊരുത്തപ്പെടുന്നു.മൂക്കിലെ സ്രവങ്ങൾ, തൊണ്ട സ്രവങ്ങൾ, മറ്റ് സാമ്പിൾ തരങ്ങൾ എന്നിവയ്ക്ക് ഇത് അനുയോജ്യമാണ്.പ്രോസസ്സ് ചെയ്ത സാമ്പിളുകൾ തത്സമയ ഫ്ലൂറസെൻസ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് PCR അല്ലെങ്കിൽ LAMP കണ്ടെത്തലിനായി നേരിട്ട് ഉപയോഗിക്കാം, കൂടാതെ സങ്കീർണ്ണമായ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ ഓപ്പറേഷനുകൾ കൂടാതെ പരമ്പരാഗത എക്സ്ട്രാക്ഷൻ രീതികളുടെ അതേ ഫലങ്ങൾ നേടാനാകും.
സംഭരണ വ്യവസ്ഥകൾ
ഊഷ്മാവിൽ കൊണ്ടുപോകുകയും സംഭരിക്കുകയും ചെയ്യുക.
ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണം
ഫങ്ഷണൽ ഡിറ്റക്ഷൻ - ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് qPCR: 800μl സാമ്പിൾ റിലീസ് റീജൻ്റ് സിസ്റ്റം വർദ്ധിപ്പിച്ചു
1000 കോപ്പികളുള്ള നോവൽ സ്യൂഡോവൈറസ്, ഒരു നാസൽ സ്വാബ് സാമ്പിൾ, ഫലമായി സമാനമായ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കർവുകൾΔCt മൂല്യങ്ങൾ ± 0.5 Ct.
പരീക്ഷണാത്മക നടപടിക്രമംres
1. 800 μl സാമ്പിൾ റിലീസ് റീജൻ്റ് എടുത്ത് 1.5 മില്ലി സാംപ്ലിംഗ് ട്യൂബിലേക്ക് ലിസിസ് ലായനി പരത്തുക
2. സ്വാബ് ഉപയോഗിച്ച് നാസൽ സ്വാബ് അല്ലെങ്കിൽ തൊണ്ടയിലെ സ്രവം എടുക്കുക; നാസൽ സ്വാബ് സാമ്പിൾ നടപടിക്രമം: അണുവിമുക്തമായ സ്വാബ് എടുത്ത് നാസാരന്ധ്രത്തിൽ ഇടുക, സാവധാനം ഏകദേശം 1.5 സെൻ്റീമീറ്റർ ആഴത്തിലേക്ക് നീങ്ങുക, 15 സെക്കൻഡിൽ കൂടുതൽ നേരം മൂക്കിലെ മ്യൂക്കോസയ്ക്ക് നേരെ 4 തവണ പതുക്കെ തിരിക്കുക. , പിന്നെ അതേ swab.Throat swab സാമ്പിൾ നടപടിക്രമം മറ്റ് നാസികാദ്വാരം അതേ ഓപ്പറേഷൻ ആവർത്തിക്കുക: അണുവിമുക്ത കൈലേസിൻറെ എടുത്തു സൌമ്യമായി, വേഗം pharyngeal tonsils ആൻഡ് റിയർ pharyngeal മതിൽ 3 തവണ തുടച്ചു.
3.സാംപ്ലിംഗ് ട്യൂബിൽ ഉടനടി സ്വാബ് വയ്ക്കുക.സാമ്പിൾ ട്യൂബിൽ സാമ്പിൾ പൂർണ്ണമായി നീക്കം ചെയ്തിട്ടുണ്ടെന്ന് ഉറപ്പാക്കാൻ, സ്വാബ് തല കറക്കി കുറഞ്ഞത് 30 സെക്കൻഡ് സ്റ്റോറേജ് ലായനിയിൽ കലർത്തണം.
4. 1 മിനിറ്റ് ഊഷ്മാവിൽ (20~ 25℃) ഇൻകുബേഷൻ, ലിസിസ് ബഫർ തയ്യാറാക്കൽ പൂർത്തിയായി.
5. 25μl സിസ്റ്റം RT-PCR ഉം RT-LAMP ഉം കണ്ടെത്തൽ പരീക്ഷണങ്ങൾക്കായി 10μl അളവിലുള്ള ടെംപ്ലേറ്റ് കൂട്ടിച്ചേർക്കലുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു.
കുറിപ്പുകൾ
1. ഒരൊറ്റ സ്വാബിന് അനുയോജ്യമായ സാമ്പിൾ ഡയറക്ട് ലൈസറ്റിൻ്റെ ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ അളവ് 400μl ആയി ക്രമീകരിക്കാം, ഇത് ടെസ്റ്റിംഗ് ആവശ്യങ്ങൾക്കനുസരിച്ച് ക്രമീകരിക്കാം.
2. സാമ്പിൾ റിലീസ് റീജൻ്റ് ഉപയോഗിച്ച് സാമ്പിൾ പ്രോസസ്സ് ചെയ്‌തുകഴിഞ്ഞാൽ, അടുത്ത ഘട്ട പരിശോധന എത്രയും വേഗം നടത്താൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു, ഇടവേള കാത്തിരിപ്പ് സമയം 1 മണിക്കൂറിൽ കുറവായിരിക്കും.
3. സാമ്പിൾ ലൈസേറ്റിൻ്റെ pH അമ്ലമാണ്, കണ്ടെത്തൽ സംവിധാനത്തിന് ഒരു നിശ്ചിത ബഫർ ആവശ്യമാണ്.ഇത് pH ബഫർ ഉപയോഗിച്ച് മിക്ക PCR, RT-PCR, LAMP ഫ്ലൂറസെൻസ് കണ്ടെത്തലുകൾക്കും അനുയോജ്യമാണ്, എന്നാൽ ബഫർ ഇല്ലാതെ LAMP കളർമെട്രിക് കണ്ടെത്തലിന് അനുയോജ്യമല്ല.
