ഒരു ഘട്ടം RT-qPCR SYBR ഗ്രീൻ പ്രീമിക്സ്
പൂച്ച നമ്പർ: HCB5140A
SYBR ഗ്രീൻ I ഡൈ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ഫ്ലൂറസെൻസ് ക്വാണ്ടിഫിക്കേഷനാണ് ഒരു ഘട്ടം RT-qPCR സൈബർ ഗ്രീൻ പ്രീമിക്സ്.ജീൻ-നിർദ്ദിഷ്ട പ്രൈമറുകൾ ഉപയോഗിച്ച്, റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷനും qPCR പ്രതികരണങ്ങളും ഒരു ട്യൂബിൽ പൂർത്തിയാക്കി, ആവർത്തിച്ചുള്ള ക്യാപ്-ഓപ്പണിംഗിൻ്റെയും പൈപ്പറ്റിംഗ് പ്രവർത്തനങ്ങളുടെയും ആവശ്യകത ഇല്ലാതാക്കുന്നു, പരിശോധന കാര്യക്ഷമത വളരെയധികം മെച്ചപ്പെടുത്തുകയും മലിനീകരണ സാധ്യത കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.ആർഎൻഎ സാമ്പിളുകൾക്കായി, കാര്യക്ഷമമായ സിഡിഎൻഎ സിന്തസിസിനായി ഹീറ്റ്-റെസിസ്റ്റൻ്റ് റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റസും ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് ആംപ്ലിഫിക്കേഷനായി ഹോട്ട്സ്റ്റാർട്ട് ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസും കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നു.ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്ത ബഫർ സിസ്റ്റത്തിന് കീഴിൽ, കിറ്റിൻ്റെ സെൻസിറ്റിവിറ്റി വളരെ പ്രകടമായ ലക്ഷ്യങ്ങൾക്ക് 0.1 pg വരെയും മിതമായ രീതിയിൽ പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ടാർഗെറ്റുകൾക്ക് 1 pg വരെയും ഉയർന്നതായിരിക്കും.ഡിഎൻഎ സാമ്പിളുകളുടെ ആംപ്ലിഫിക്കേഷനും അളവെടുപ്പിനും കിറ്റ് അനുയോജ്യമാണ്.വ്യത്യസ്ത സസ്യങ്ങളുടെയും മൃഗങ്ങളുടെയും സാമ്പിളുകൾ, കോശങ്ങൾ, സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ എന്നിവയിൽ നിന്നുള്ള ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളുടെ സെൻസിറ്റീവ് കണ്ടെത്തലും അളവും ഇത് സാധ്യമാക്കുന്നു.
ഘടകങ്ങൾ
No | പേര് | വ്യാപ്തം | വ്യാപ്തം |
1 | വിപുലമായ ബഫർ | 250 μL | 2×1.25 മില്ലി |
2 | വിപുലമായ എൻസൈം മിക്സ് | 20 μL | 200 μL |
3 | ആർനേസ് ഫ്രീ എച്ച്2O | 250 μL | 2×1.25 മില്ലി |
സംഭരണ വ്യവസ്ഥകൾ
ഈ ഉൽപ്പന്നം 1 വർഷത്തേക്ക് -25~-15℃ പ്രകാശത്തിൽ നിന്ന് അകലെ സൂക്ഷിക്കണം.
നിർദ്ദേശങ്ങൾ
1.റിയാക്ഷൻ സിസ്റ്റം കോൺഫിഗറേഷൻd
ഘടകങ്ങൾ | വോളിയം (μL) | വോളിയം (μL) | അന്തിമ ഏകാഗ്രത |
വിപുലമായ ബഫർ | 12.5 | 25 | 1× |
വിപുലമായ എൻസൈം മിക്സ് | 1 | 2 | - |
ഫോർവേഡ് പ്രൈമർ (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
റിവേഴ്സ് പ്രൈമർ (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
RNA ടാംപ്ലേറ്റ്b | X | X | - |
ആർനേസ് ഫ്രീ എച്ച്2ഒc | 25 വരെ | 50 വരെ | - |
കുറിപ്പുകൾ:
1) എ.ടിഅവസാന പ്രൈമർ കോൺസൺട്രേഷൻ 0.2 μmol/L ആയിരുന്നു, അത് 0.1 നും 1μmol/L നും ഇടയിൽ ക്രമീകരിക്കാം.
2) ബി.റീജൻ്റ് വളരെ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്, മൊത്തം RNA 1pg-1μg പരിധിയിലാണ്, കൂടാതെ മനുഷ്യ സാമ്പിളുകളുടെ പരിശോധനയിൽ 1 pg-100 ng എന്ന ഒപ്റ്റിമൽ ഇൻപുട്ട് കാണിച്ചു, മൊത്തത്തിലുള്ള Ct മൂല്യം 15-30 പരിധിയിൽ നിയന്ത്രിക്കുന്നു.
3) സി.ടാർഗെറ്റ് ജീൻ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ്റെ സാധുതയും പുനരുൽപാദനക്ഷമതയും ഉറപ്പാക്കാൻ 20μL അല്ലെങ്കിൽ 50μL ഉപയോഗിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
4) ഡി.അൾട്രാ ക്ലീൻ ബെഞ്ചിൽ തയ്യാറാക്കി ന്യൂക്ലീസ് അവശിഷ്ടങ്ങളില്ലാത്ത നുറുങ്ങുകളും പ്രതികരണ ട്യൂബുകളും ഉപയോഗിക്കുക;ഫിൽട്ടർ കാട്രിഡ്ജുകളുള്ള നുറുങ്ങുകൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.ക്രോസ് മലിനീകരണവും എയറോസോൾ മലിനീകരണവും ഒഴിവാക്കുക.
2.പ്രതികരണ പരിപാടി
സൈക്കിൾ ഘട്ടം | താൽക്കാലികം. | സമയം | സൈക്കിളുകൾ |
റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ | 50℃a | 6 മിനിറ്റ് | 1 |
പ്രാരംഭ ഡീനാറ്ററേഷൻ | 95℃ | 5 മിനിറ്റ് | 1 |
ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പ്രതികരണം | 95℃ | 15 സെ | 40 |
60℃b | 30 സെ | ||
ഉരുകൽ കർവ് ഘട്ടം | ഇൻസ്ട്രുമെൻ്റ് ഡിഫോൾട്ടുകൾ | 1 |
കുറിപ്പുകൾ:
1) എ.പരീക്ഷണാത്മക ആവശ്യങ്ങൾക്കനുസരിച്ച് റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ താപനില 50-55 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് വരെ തിരഞ്ഞെടുക്കാം.ഡിഎൻഎ സാമ്പിളുകൾക്ക്, റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ പ്രക്രിയ ഒഴിവാക്കാവുന്നതാണ്.
2) ബി.പ്രത്യേക സന്ദർഭങ്ങളിൽ പ്രൈമർ Tm മൂല്യം അനുസരിച്ച് അനീലിംഗ് / എക്സ്റ്റൻഷൻ താപനില ക്രമീകരിക്കാൻ കഴിയും, 60 ° C ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
കുറിപ്പുകൾ
1. ഈ ഉൽപ്പന്നം ഗവേഷണ ഉപയോഗത്തിന് മാത്രമുള്ളതാണ്.
2. നിങ്ങളുടെ സുരക്ഷയ്ക്കായി ലാബ് കോട്ടുകളും ഡിസ്പോസിബിൾ കയ്യുറകളും ഉപയോഗിച്ച് പ്രവർത്തിക്കുക.