2×HiF Taq പ്ലസ് മാസ്റ്റർ മിക്സ്
പൂച്ച നമ്പർ: HCR2014B
പ്ലസ് എച്ച്ഐഎഫ് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ്, ഡിഎൻടിപികൾ, ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്ത ബഫർ എന്നിവ അടങ്ങിയ 2×പ്രീമിക്‌സ്ഡ് സൊല്യൂഷനാണ് എച്ച്ഐഎഫ് ടാക് പ്ലസ് മാസ്റ്റർ മിക്സ് (ഡൈയ്‌ക്കൊപ്പം).പോളിമറേസ് പ്രവർത്തനത്തെയും 3′→5′എക്സോന്യൂക്ലീസ് പ്രവർത്തനത്തെയും തടയുന്ന മുറിയിലെ ഊഷ്മാവിൽ രണ്ട് മോണോക്ലോണൽ ആൻ്റിബോഡികൾ മാസ്റ്റർ മിക്സിലേക്ക് അനായാസവും വളരെ നിർദ്ദിഷ്ടവുമായ ഹോട്ട് സ്റ്റാർട്ട് പിസിആറിനായി ചേർക്കുന്നു.എൻസൈമിന് ഒരു നീണ്ട ശകലം ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കപ്പാസിറ്റി നൽകാൻ മാസ്റ്റർ മിക്സിലേക്ക് എക്സ്റ്റൻഷൻ ഫാക്ടർ ചേർത്തിരിക്കുന്നു, ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ്റെ നീളം 13 കെബി വരെയാകാം, എൻസൈമിന് 5′→3′ ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് പ്രവർത്തനവും 3′→5′ ഉണ്ട്. എക്സോന്യൂക്ലീസ് പ്രവർത്തനം, അതിൻ്റെ വിശ്വസ്തത ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസിനേക്കാൾ 83 മടങ്ങാണ്, ഇത് സാധാരണ ഡിഎൻഎ പോളിമറേസിനേക്കാൾ 9 മടങ്ങാണ്.സങ്കീർണ്ണമായ ടെംപ്ലേറ്റുകൾ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് ഇത് അനുയോജ്യമാണ്, ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉൽപ്പന്നം ഒരു ബ്ലണ്ട് എൻഡ് ആണ്.
2×HIF Taq പ്ലസ് മാസ്റ്റർ മിക്‌സിന് (ഡൈയ്‌ക്കൊപ്പം) വേഗതയേറിയതും എളുപ്പമുള്ളതും, ഉയർന്ന സംവേദനക്ഷമത, ശക്തമായ പ്രത്യേകത, നല്ല സ്ഥിരത മുതലായവയുടെ ഗുണങ്ങളുണ്ട്, പ്രതികരണ സംവിധാനത്തിന് പ്രൈമറുകളും ടെംപ്ലേറ്റുകളും ചേർക്കാൻ മാത്രമേ ആവശ്യമുള്ളൂ, കൂടാതെ രണ്ടായി വർദ്ധിപ്പിക്കാനും കഴിയും. സ്റ്റെപ്പ് പ്രോട്ടോക്കോൾ, പരീക്ഷണ ഘട്ടങ്ങൾ ലളിതമാക്കുകയും സമയം ലാഭിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.ഈ ഉൽപ്പന്നത്തിൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ഇൻഡിക്കേറ്റർ ഡൈകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, കൂടാതെ പിസിആർ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിനായി നേരിട്ട് ഉപയോഗിക്കാം.കൂടാതെ, ഉൽപ്പന്നത്തിൽ ഒരു പ്രത്യേക സംരക്ഷണ ഏജൻ്റും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, അതുവഴി ആവർത്തിച്ചുള്ള ഫ്രീസ്-തൗവിന് ശേഷം മാസ്റ്റർ മിശ്രിതത്തിന് സ്ഥിരമായ പ്രവർത്തനം നിലനിർത്താൻ കഴിയും.
സംഭരണ വ്യവസ്ഥകൾ
ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ -25~-15℃ 1 വർഷത്തേക്ക് സൂക്ഷിക്കണം.
സ്പെസിഫിക്കേഷനുകൾ
| ഉൽപ്പന്ന സ്പെസിഫിക്കേഷൻ | മാസ്റ്റർ മിക്സ് |
| ഏകാഗ്രത | 2× |
| ചൂടുള്ള തുടക്കം | ബിൽറ്റ്-ഇൻ ഹോട്ട് സ്റ്റാർട്ട് |
| ഓവർഹാംഗ് | ബ്ലണ്ട് |
| പ്രതികരണ വേഗത | അതിവേഗം |
| വലിപ്പം (അവസാന ഉൽപ്പന്നം) | 13kb വരെ |
| ഗതാഗതത്തിനുള്ള വ്യവസ്ഥകൾ | ഡ്രൈ ഐസ് |
| ഉൽപ്പന്ന തരം | ഉയർന്ന വിശ്വാസ്യതയുള്ള PCR പ്രീമിക്സുകൾ |
നിർദ്ദേശങ്ങൾ
1.PCR പ്രതികരണ സംവിധാനം
| ഘടകങ്ങൾ | വോളിയം (μL) |
| DNA ടെംപ്ലേറ്റ് | അനുയോജ്യം |
| ഫോർവേഡ് പ്രൈമർ (10 μmol/L) | 2.5 |
| റിവേഴ്സ് പ്രൈമർ (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq പ്ലസ് മാസ്റ്റർ മിക്സ് | 25 |
| ddH2O | 50 വരെ |
2.വ്യത്യസ്ത ടെംപ്ലേറ്റുകളുടെ ശുപാർശിത ഉപയോഗം
| ടെംപ്ലേറ്റിൻ്റെ തരം | ശകലങ്ങൾ 1kb മുതൽ 10 kb വരെ വർദ്ധിപ്പിക്കുക |
| ജീനോമിക് ഡിഎൻഎ | 50ng-200 ng |
| പ്ലാസ്മിഡ് അല്ലെങ്കിൽ വൈറൽ ഡിഎൻഎ | 10pg-20ng |
| cDNA | 1-2.5 µL (അവസാന പിസിആർ പ്രതികരണ വോളിയത്തിൻ്റെ 10% കവിയരുത്) |
3.ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പ്രോട്ടോക്കോൾ
1) ടു-സ്റ്റെപ്പ് പ്രോട്ടോക്കോൾ (സങ്കീർണ്ണത ടെംപ്ലേറ്റ്)
| സൈക്കിൾ ഘട്ടം | താൽക്കാലികം. | സമയം | സൈക്കിളുകൾ |
| പ്രാരംഭ ഡീനാറ്ററേഷൻ | 98℃ | 3 മിനിറ്റ് | 1 |
| ഡീനാറ്ററേഷൻ | 98℃ | 10 സെക്കൻഡ് | 30-35 |
| വിപുലീകരണം | 68℃ | 30 സെക്കൻഡ്/കെബി | |
| അന്തിമ വിപുലീകരണം | 72℃ | 5 മിനിറ്റ് | 1 |
2) ത്രീ-സ്റ്റെപ്പ് പ്രോട്ടോക്കോൾ (പതിവ് പ്രോട്ടോക്കോൾ)
| സൈക്കിൾ ഘട്ടം | താൽക്കാലികം. | സമയം | സൈക്കിളുകൾ |
| പ്രാരംഭ ഡീനാറ്ററേഷൻ | 98℃ | 3 മിനിറ്റ് | 1 |
| ഡീനാറ്ററേഷൻ | 98℃ | 10 സെക്കൻഡ് | 30-35 |
| അനീലിംഗ് | 60℃ | 20 സെ | |
| വിപുലീകരണം | 72℃ | 30 സെക്കൻഡ്/കെബി | |
| അന്തിമ വിപുലീകരണം | 72℃ | 5 മിനിറ്റ് | 1 |
3) അനീലിംഗ് ഗ്രേഡിയൻ്റ് പ്രോട്ടോക്കോൾ (സങ്കീർണ്ണത ടെംപ്ലേറ്റ്)
| സൈക്കിൾ ഘട്ടം | താപനില | സമയം | സൈക്കിളുകൾ |
| പ്രാരംഭ ഡീനാറ്ററേഷൻ | 98℃ | 3 മിനിറ്റ് | 1 |
| ഡീനാറ്ററേഷൻ | 98℃ | 10 സെ | 15 (ഓരോ സൈക്കിളിലും 1℃ കുറവ്) |
| ഗ്രേഡിയൻ്റ് അനീലിംഗ് | 70-55℃ | 20 സെ | |
| വിപുലീകരണം | 72℃ | 30 സെക്കൻഡ്/കെബി | |
| ഡീനാറ്ററേഷൻ | 98℃ | 10 സെ |
20 |
| അനീലിംഗ് | 55℃ | 20 സെ | |
| വിപുലീകരണം | 72℃ | 30 സെക്കൻഡ്/കെബി | |
| അന്തിമ വിപുലീകരണം | 72℃ | 5 മിനിറ്റ് | 1 |
വ്യത്യസ്ത ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പ്രോട്ടോക്കോളിന് കീഴിലുള്ള സവിശേഷതകൾ
| പ്രോട്ടോക്കോl | രണ്ട്-ഘട്ടം | മൂന്ന്-പടി | ഗ്രേഡിയൻ്റ് അനീലിംഗ് |
| സ്പെസിഫിക്കേഷൻ. | വേഗം | ഇടത്തരം | പതുക്കെ |
| പ്രത്യേകത | ഉയർന്ന | ഇടത്തരം | ഉയർന്ന |
| PCR വിളവ് | ഇടത്തരം | ഉയർന്ന | ഇടത്തരം |
| കണ്ടെത്തൽ നിരക്ക് | ഉയർന്ന | ഇടത്തരം | ഉയർന്ന |
കുറിപ്പുകൾ
നിങ്ങളുടെ ആരോഗ്യവും സുരക്ഷയും ഉറപ്പാക്കാൻ ആവശ്യമായ പിപിഇ, ലാബ് കോട്ട്, കയ്യുറകൾ എന്നിവ ധരിക്കുക!
