ട്രിപ്സിനിനുള്ള എലീസ കിറ്റ്

റീകോമ്പിനന്റ് ട്രൈപ്സിൻ ബയോഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ നിർമ്മാണത്തിൽ-സെൽ തയ്യാറാക്കുന്ന സമയത്തോ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ പരിഷ്ക്കരണത്തിനും സജീവമാക്കലിനും പതിവായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.ട്രിപ്സിൻ സുരക്ഷാ അപകടസാധ്യതകൾ ഉയർത്തുന്നു, അതിനാൽ അന്തിമ ഉൽപ്പന്നം പുറത്തിറക്കുന്നതിന് മുമ്പ് അത് നീക്കം ചെയ്യണം.ഈ സാൻഡ്‌വിച്ച് കിറ്റ്, ട്രൈപ്‌സിൻ ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ, സെൽ കൾച്ചർ സൂപ്പർനാറ്റന്റിലും ബയോഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ നിർമ്മാണത്തിലെ മറ്റ് നടപടിക്രമങ്ങളിലും ശേഷിക്കുന്ന ട്രൈപ്‌സിൻ അളവ് അളക്കുന്നതിനുള്ളതാണ്.

ഈ കിറ്റ് ഒരു എൻസൈം-ലിങ്ക്ഡ് ഇമ്മ്യൂണോസോർബന്റ് അസ്സെ (ELISA) ആണ്.പ്ലേറ്റ് പോർസൈൻ ട്രിപ്സിൻ ആന്റിബോഡി ഉപയോഗിച്ച് മുൻകൂട്ടി പൂശിയിരിക്കുന്നു.സാമ്പിളിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന ട്രിപ്സിൻ ചേർക്കപ്പെടുകയും കിണറുകളിൽ പൊതിഞ്ഞ ആന്റിബോഡികളുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.തുടർന്ന് ബയോട്ടിനൈലേറ്റഡ് പോർസൈൻ ട്രൈപ്‌സിൻ ആന്റിബോഡി ചേർക്കപ്പെടുകയും സാമ്പിളിലെ ട്രൈപ്‌സിനുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.കഴുകിയ ശേഷം, HRP-Streptavidin ചേർത്ത് ബയോട്ടിനൈലേറ്റഡ് ട്രിപ്സിൻ ആന്റിബോഡിയുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു.ഇൻകുബേഷൻ അൺബൗണ്ട് ചെയ്ത ശേഷം HRP-Streptavidin കഴുകി കളയുന്നു.പിന്നീട് TMB സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് ലായനി ചേർത്ത് HRP ഉത്തേജിപ്പിക്കുകയും ഒരു നീല നിറമുള്ള ഉൽപ്പന്നം നിർമ്മിക്കുകയും അത് അമ്ല സ്റ്റോപ്പ് ലായനി ചേർത്ത ശേഷം മഞ്ഞയായി മാറുകയും ചെയ്യുന്നു.മഞ്ഞയുടെ സാന്ദ്രത ട്രിപ്സിൻ ടാർഗെറ്റ് അളവിന് ആനുപാതികമാണ്
സാമ്പിൾ പ്ലേറ്റിൽ പിടിച്ചെടുത്തു.ആഗിരണം 450 nm ആണ്.