അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ്
അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ്, സെറാറ്റിയ മാർസെസെൻസിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ ഒരു ജനിതക എഞ്ചിനീയറിംഗ് എൻഡോ ന്യൂക്ലേസാണ്, ഇത് ഡിഎൻഎ അല്ലെങ്കിൽ ആർഎൻഎയെ തരംതാഴ്ത്താൻ കഴിവുള്ളതാണ്, ഇത് ഇരട്ട അല്ലെങ്കിൽ ഒറ്റ സ്ട്രാൻഡഡ്, രേഖീയമോ വൃത്താകൃതിയിലുള്ളതോ ആയ അവസ്ഥയിൽ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളെ 5'-മോണോഫോസ്ഫേറ്റ് 5' നീളമുള്ള 3-ന്യൂക്ലിയോ ന്യൂക്ലിയോ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളായി പൂർണ്ണമായും വിഘടിപ്പിക്കുന്നു. .ജനിതക എഞ്ചിനീയറിംഗ് പരിഷ്ക്കരണത്തിന് ശേഷം, ഉൽപന്നം എഷെറിച്ചിയ കോളിയിൽ (ഇ. കോളി) പുളിപ്പിച്ച്, പ്രകടിപ്പിക്കുകയും ശുദ്ധീകരിക്കുകയും ചെയ്തു, ഇത് സെൽ സൂപ്പർനാറ്റൻ്റുകളുടെയും സെൽ ലൈസേറ്റ് ശാസ്ത്രീയ ഗവേഷണത്തിൻ്റെയും വിസ്കോസിറ്റി കുറയ്ക്കുന്നു, മാത്രമല്ല പ്രോട്ടീൻ്റെ ശുദ്ധീകരണ കാര്യക്ഷമതയും പ്രവർത്തന ഗവേഷണവും മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നു.ജീൻ തെറാപ്പി, വൈറസ് ശുദ്ധീകരണം, വാക്സിൻ ഉൽപ്പാദനം, പ്രോട്ടീൻ, പോളിസാക്രറൈഡ് ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ വ്യവസായം എന്നിവയിലും ഇത് ഒരു ഹോസ്റ്റ് അവശിഷ്ട ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് നീക്കം ചെയ്യാനുള്ള പ്രതിവിധിയായി ഉപയോഗിക്കാം.
ഉൽപ്പന്ന സവിശേഷതകൾ
CAS നമ്പർ. | 9025-65-4 |
ഇസി നമ്പർ. | |
തന്മാത്രാ ഭാരം | 30kDa |
ഐസോഇലക്ട്രിക് പോയിൻ്റ് | 6.85 |
പ്രോട്ടീൻ പ്യൂരിറ്റി | ≥99% (എസ്ഡിഎസ്-പേജ് & എസ്ഇസി-എച്ച്പിഎൽസി) |
പ്രത്യേക പ്രവർത്തനം | ≥1.1×106U/mg |
ഒപ്റ്റിമൽ താപനില | 37°C |
ഒപ്റ്റിമൽ പി.എച്ച് | 8.0 |
പ്രോട്ടീസ് പ്രവർത്തനം | നെഗറ്റീവ് |
ബയോബർഡൻ | 10CFU/100,000U |
ശേഷിക്കുന്ന ഹോസ്റ്റ്-സെൽ പ്രോട്ടീൻ | ≤10ppm |
ഹെവി മെറ്റൽ | ≤10ppm |
ബാക്ടീരിയ എൻഡോടോക്സിൻ | 0.25EU/1000U |
സ്റ്റോറേജ് ബഫർ | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2 , 20mM NaCl, 50% ഗ്ലിസറോൾ |
സംഭരണ വ്യവസ്ഥകൾ
≤0°C ഗതാഗതം;-25~-15°C സംഭരണം,2 വർഷത്തെ സാധുത (ഫ്രീസിംഗ്-തവിങ്ങ് ഒഴിവാക്കുക).
യൂണിറ്റ് നിർവ്വചനം
37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 30 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ △A260 ൻ്റെ ആഗിരണ മൂല്യം 1.0 ആയി മാറ്റാൻ ഉപയോഗിക്കുന്ന എൻസൈമിൻ്റെ അളവ്, ഒലിഗോ ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകളായി മുറിച്ച് ദഹിപ്പിച്ച 37μg സാൽമൺ ബീജ ഡിഎൻഎയ്ക്ക് തുല്യമായ pH 8.0, ഒരു സജീവ യൂണിറ്റ് (U) ആയി നിർവചിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്.
ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണം
ശേഷിക്കുന്ന ഹോസ്റ്റ്-സെൽ പ്രോട്ടീൻ: ELISA കിറ്റ്
•പ്രോട്ടീസ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ: 250KU/mL അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ് 60 മിനിറ്റ് സബ്സ്ട്രേറ്റുമായി പ്രതിപ്രവർത്തിച്ചു, ഒരു പ്രവർത്തനവും കണ്ടെത്തിയില്ല.
•ബാക്ടീരിയ എൻഡോടോക്സിൻ: LAL-Test, Pharmacopoeia of the People's Republic of China വോളിയം 4 (2020 പതിപ്പ്) ജെൽ ലിമിറ്റ് ടെസ്റ്റ് രീതി.പൊതു നിയമങ്ങൾ (1143).
•ജൈവഭാരം: പീപ്പിൾസ് റിപ്പബ്ലിക് ഓഫ് ചൈനയുടെ ഫാർമക്കോപ്പിയ വാല്യം 4 (2020 പതിപ്പ്)— ജനറൽ
സ്റ്റെറിലിറ്റി ടെസ്റ്റിനുള്ള നിയമങ്ങൾ (1101), PRC നാഷണൽ സ്റ്റാൻഡേർഡ്, GB 4789.2-2016.
•ഹെവി മെറ്റൽ:ICP-AES, HJ776-2015.
ഓപ്പറേഷൻ
SDS കോൺസൺട്രേഷൻ 0.1% അല്ലെങ്കിൽ EDTA-യിൽ കൂടുതലായപ്പോൾ അൾട്രാ ന്യൂക്ലീസ് പ്രവർത്തനം ഗണ്യമായി തടഞ്ഞു.
ഏകാഗ്രത 1mM-ൽ കൂടുതലായിരുന്നു. സർഫക്ടൻ്റ് ട്രൈറ്റൺ X- 100, ട്വീൻ 20, ട്വീൻ 80 എന്നിവ ന്യൂക്ലീസിനെ സ്വാധീനിച്ചില്ല.
ഏകാഗ്രത 1.5% ൽ താഴെ ആയിരുന്നപ്പോൾ ഉള്ള പ്രോപ്പർട്ടികൾ.
ഓപ്പറേഷൻ | ഒപ്റ്റിമൽ ഓപ്പറേഷൻ | സാധുവായ പ്രവർത്തനം |
താപനില | 37℃ | 0-45℃ |
pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
Mg2+ | 1-2എംഎം | 1- 15 മി.മീ |
ഡി.ടി.ടി | 0- 100എംഎം | >100എംഎം |
2-മെർകാപ്റ്റോഎത്തനോൾ | 0- 100എംഎം | >100എംഎം |
മോണോവാലൻ്റ് ലോഹ അയോൺ (Na+, K+ മുതലായവ) | 0-20 മി.മീ | 0-200എംഎം |
PO43- | 0- 10 മി.മീ | 0- 100എംഎം |
ഉപയോഗവും അളവും
• വാക്സിൻ ഉൽപ്പന്നങ്ങളിൽ നിന്ന് എക്സോജനസ് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് നീക്കം ചെയ്യുക, ശേഷിക്കുന്ന ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വിഷബാധയുടെ സാധ്യത കുറയ്ക്കുകയും ഉൽപ്പന്ന സുരക്ഷ മെച്ചപ്പെടുത്തുകയും ചെയ്യുക.
• ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് മൂലമുണ്ടാകുന്ന തീറ്റ ദ്രാവകത്തിൻ്റെ വിസ്കോസിറ്റി കുറയ്ക്കുക, പ്രോസസ്സിംഗ് സമയം കുറയ്ക്കുക, പ്രോട്ടീൻ വിളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുക.
• കണിക പൊതിഞ്ഞ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് നീക്കം ചെയ്യുക (വൈറസ്, ഇൻക്ലൂഷൻ ബോഡി മുതലായവ), അത് അനുകൂലമാണ്
കണികയുടെ പ്രകാശനത്തിനും ശുദ്ധീകരണത്തിനും.
പരീക്ഷണാത്മക തരം | പ്രോട്ടീൻ ഉത്പാദനം | വൈറസ്, വാക്സിൻ | സെൽ മരുന്നുകൾ |
സെല്ലുകളുടെ എണ്ണം | 1 ഗ്രാം സെൽ ആർദ്ര ഭാരം (10ml ബഫർ ഉപയോഗിച്ച് വീണ്ടും സസ്പെൻഡ് ചെയ്തു) | 1L അഴുകൽ ദ്രാവക സൂപ്പർനറ്റൻ്റ് | 1L സംസ്കാരം |
കുറഞ്ഞ അളവ് | 250U | 100U | 100U |
ശുപാർശ ചെയ്യുന്ന അളവ് | 2500U | 25000U | 5000U |
• കോളം ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി, ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്, ബ്ലോട്ടിംഗ് അനാലിസിസ് എന്നിവയ്ക്കായി ന്യൂക്ലീസ് ചികിത്സയ്ക്ക് സാമ്പിളിൻ്റെ മിഴിവും വീണ്ടെടുക്കലും മെച്ചപ്പെടുത്താൻ കഴിയും.
• ജീൻ തെറാപ്പിയിൽ, ശുദ്ധീകരിച്ച അഡിനോ-അസോസിയേറ്റഡ് വൈറസുകൾ ലഭിക്കാൻ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് നീക്കം ചെയ്യപ്പെടുന്നു.