Bst 2.0 DNA പോളിമറേസ് (ഗ്ലിസറോൾ ഫ്രീ, ഉയർന്ന സാന്ദ്രത)
5′→3′ ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് പ്രവർത്തനവും ശക്തമായ ചെയിൻ റീപ്ലേസ്മെൻ്റ് പ്രവർത്തനവുമുള്ള ബാസിലസ് സ്റ്റെറോതെർമോഫിലസ് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് I-ൽ നിന്നാണ് ബിഎസ്ടി ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് വി2 ഉരുത്തിരിഞ്ഞത്, എന്നാൽ 5′→3′ എക്സോന്യൂക്ലീസ് പ്രവർത്തനമില്ല.സ്ട്രാൻഡ്-ഡിസ്പ്ലേസ്മെൻ്റ്, ഐസോതെർമൽ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ LAMP (ലൂപ്പ് മീഡിയേറ്റഡ് ഐസോതെർമൽ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ), ദ്രുത ക്രമം എന്നിവയ്ക്ക് Bst DNA പോളിമറേസ് V2 അനുയോജ്യമാണ്.ഈ ബിഎസ്ടി ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് വി2, ഊഷ്മാവിൽ ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് പ്രവർത്തനത്തെ തടയാൻ പ്രാപ്തമാണ്, അങ്ങനെ അത് പ്രവർത്തിപ്പിക്കാനും ഊഷ്മാവിൽ പ്രതിപ്രവർത്തന സംവിധാനം രൂപപ്പെടുത്താനും കഴിയും, നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്ത ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ തടയുകയും പ്രതികരണത്തിൻ്റെ കാര്യക്ഷമത മെച്ചപ്പെടുത്തുകയും ചെയ്യുന്നു, കൂടാതെ ഈ പതിപ്പിന് കഴിയും ലയോഫിലൈസ് ചെയ്യപ്പെടും.കൂടാതെ, ഉയർന്ന താപനിലയിൽ അതിൻ്റെ പ്രവർത്തനം പുറത്തുവിടാൻ ഇത് പ്രാപ്തമാണ്, അങ്ങനെ ഒരു പ്രത്യേക ആക്ടിവേഷൻ ഘട്ടത്തിൻ്റെ ആവശ്യകത ഇല്ലാതാക്കുന്നു.
ഘടകങ്ങൾ
ഘടകം | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
Bst DNA പോളിമറേസ് V2 (ഗ്ലിസറോൾ രഹിതം) (32U/μL) | 0.05 മി.ലി | 0.25 മി.ലി | 2.5 മി.ലി |
10×HC Bst V2 ബഫർ | 1.5 മി.ലി | 2×1.5 മില്ലി | 3×10 മില്ലി |
MgSO4 (100എംഎം) | 1.5 മി.ലി | 2×1.5 മില്ലി | 2×10 മില്ലി |
അപേക്ഷകൾ
1.LAMP ഐസോതെർമൽ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ
2.ഡിഎൻഎ സ്ട്രാൻഡ് സിംഗിൾ ഡിസ്പ്ലേസ്മെൻ്റ് പ്രതികരണം
3.ഉയർന്ന ജിസി ജീൻ സീക്വൻസിങ്
4.നാനോഗ്രാം ലെവലിൻ്റെ ഡിഎൻഎ സീക്വൻസിങ്.
സ്റ്റോറേജ് അവസ്ഥ
0 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ താഴെയുള്ള ഗതാഗതം, -25°C~-15°C-ൽ സൂക്ഷിക്കുക.
യൂണിറ്റ് നിർവ്വചനം
65 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 30 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ 25 nmol dNTP ആസിഡ് ലയിക്കാത്ത വസ്തുക്കളിൽ സംയോജിപ്പിക്കുന്ന എൻസൈമിൻ്റെ അളവാണ് ഒരു യൂണിറ്റ് നിർവചിച്ചിരിക്കുന്നത്.
ലാമ്പ് പ്രതികരണം
ഘടകങ്ങൾ | 25 μLസിസ്റ്റം |
10×HC Bst V2 ബഫർ | 2.5 μL |
MgSO4 (100എംഎം) | 1.5 μL |
dNTP-കൾ (10mM വീതം) | 3.5 μL |
SYTO™ 16 പച്ച (25×)a | 1.0 μL |
പ്രൈമർ മിക്സ്b | 6 μL |
Bst DNA പോളിമറേസ് V2 (ഗ്ലിസറോൾ രഹിതം) (32 U/uL) | 0.25 μL |
ടെംപ്ലേറ്റ് | × μL |
ddH₂O | 25 μL വരെ |
കുറിപ്പുകൾ:
1) എ.SYTOTM 16 പച്ച (25×): പരീക്ഷണ ആവശ്യങ്ങൾക്കനുസരിച്ച്, മറ്റ് ചായങ്ങൾ പകരമായി ഉപയോഗിക്കാം;
2) ബി.പ്രൈമർ മിക്സ്: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB എന്നിവയും മറ്റ് വോള്യങ്ങളും മിക്സ് ചെയ്ത് ലഭിക്കും.
പ്രതികരണവും അവസ്ഥയും
1 × HC Bst V2 ബഫർ, ഇൻകുബേഷൻ താപനില 60°C നും 65°C നും ഇടയിലാണ്.
ചൂട് നിഷ്ക്രിയമാക്കൽ
80°C, 20മിനിറ്റ്