വൺ സ്റ്റെപ്പ് ഫാസ്റ്റ് RT-qPCR പ്രോബ് Premix-UNG
പൂച്ച നമ്പർ: HCR5143A
വൺ സ്റ്റെപ്പ് RT-qPCR പ്രോബ് കിറ്റ് (ഫാസ്റ്റ് ഫോർ ഫാസ്റ്റ്) എന്നത് ഒരു ടെംപ്ലേറ്റായി ആർഎൻഎ ഉപയോഗിക്കുന്ന (ആർഎൻഎ വൈറസ് പോലുള്ളവ) സിംഗിൾ-പ്ലെക്‌സിനോ മൾട്ടിപ്ലക്‌സ് ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് പിസിആറിനോ അനുയോജ്യമായ ഒരു പ്രോബ് അധിഷ്ഠിത RT-qPCR ഫാസ്റ്റ് ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റാണ്.വേഗത്തിലുള്ള ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ വേഗതയും ഉയർന്ന ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കാര്യക്ഷമതയും പ്രത്യേകതയും ഉള്ള ദ്രുത ആംപ്ലിഫിക്കേഷനായി ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്ത ബഫർ സഹിതം ഈ ഉൽപ്പന്നം പുതിയ തലമുറ ആൻ്റിബോഡി-പരിഷ്കരിച്ച Taq DNA പോളിമറേസും ഒരു-ഘട്ട സമർപ്പിത റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റസും ഉപയോഗിക്കുന്നു.കുറഞ്ഞ സമയത്തിനുള്ളിൽ ഉയർന്നതും സാന്ദ്രത കുറഞ്ഞതുമായ സാമ്പിളുകളുടെ സിംഗിൾ-പ്ലെക്സിലും മൾട്ടിപ്ലക്സിലും സമതുലിതമായ ആംപ്ലിഫിക്കേഷനെ ഇത് പിന്തുണയ്ക്കുന്നു.
ഘടകങ്ങൾ
1. 5×RT-qPCR ബഫർ (U+)
2. എൻസൈം മിക്സ് (U+)
കുറിപ്പുകൾ:
എ.5×RT-qPCR ബഫറിൽ (U+) dNTP, Mg എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു2+;
ബി.എൻസൈം മിക്സിൽ (U+) റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റേസ്, ഹോട്ട് സ്റ്റാർട്ട് ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ്, RNase ഇൻഹിബിറ്റർ, UDG എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു;
സി.RNase-Free നുറുങ്ങുകൾ, EP ട്യൂബുകൾ മുതലായവ ഉപയോഗിക്കുക.
ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് മുമ്പ്, 5×RT-qPCR ബഫർ (U+) നന്നായി മിക്സ് ചെയ്യുക.ഉരുകിയതിന് ശേഷം എന്തെങ്കിലും മഴയുണ്ടെങ്കിൽ, ബഫർ റൂം താപനിലയിലേക്ക് മടങ്ങുന്നത് വരെ കാത്തിരിക്കുക, ഇളക്കി അലിയിക്കുക, തുടർന്ന് അവ സാധാരണ രീതിയിൽ ഉപയോഗിക്കുക.
സംഭരണ വ്യവസ്ഥകൾ
ഡ്രൈ ഐസ് ഉപയോഗിച്ചാണ് ഉൽപ്പന്നം കയറ്റി അയക്കുന്നത്, 1 വർഷത്തേക്ക് -25~-15℃ വരെ സൂക്ഷിക്കാം.
നിർദ്ദേശങ്ങൾ
1. പ്രതികരണം സിസ്റ്റം
| ഘടകങ്ങൾ | വോളിയം (20 μL പ്രതികരണം) |
| 2 × RT-qPCR ബഫർ | 4μL |
| എൻസൈം മിക്സ് (U+) | 0.8μL |
| പ്രൈമർ ഫോർവേഡ് | 0.1~ 1.0μM |
| പ്രൈമർ റിവേഴ്സ് | 0.1~ 1.0μM |
| തക്മാൻ അന്വേഷണം | 0.05~0.25μM |
| ടെംപ്ലേറ്റ് | X μL |
| RNase-ഫ്രീ വാട്ടർ | 25μL വരെ |
കുറിപ്പുകൾ: പ്രതികരണത്തിൻ്റെ അളവ് 10-50μL ആണ്.
2. സൈക്ലിംഗ് പ്രോട്ടോക്കോൾ (എസ്താൻഡാർഡ്)
| സൈക്കിൾ ഘട്ടം | താൽക്കാലികം. | സമയം | സൈക്കിളുകൾ |
| റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ | 55 ℃ | 10 മിനിറ്റ് | 1 |
| പ്രാരംഭ ഡീനാറ്ററേഷൻ | 95 ℃ | 30 സെ | 1 |
| ഡീനാറ്ററേഷൻ | 95 ℃ | 10 സെ | 45 |
| അനീലിംഗ് / എക്സ്റ്റൻഷൻ | 60 ℃ | 30 സെ |
| സൈക്ലിംഗ് പ്രോട്ടോക്കോൾ (വേഗത) സൈക്കിൾ ഘട്ടം |
താൽക്കാലികം. |
സമയം |
സൈക്കിളുകൾ |
| റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ | 55 ℃ | 5 മിനിറ്റ് | 1 |
| പ്രാരംഭ ഡീനാറ്ററേഷൻ | 95 ℃ | 5 സെ | 1 |
| ഡീനാറ്ററേഷൻ | 95 ℃ | 3 സെ | 43 |
| അനീലിംഗ് / എക്സ്റ്റൻഷൻ | 60 ℃ | 10 സെ |
കുറിപ്പുകൾ:
എ.റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ താപനില 50℃ മുതൽ 60℃ വരെയാണ്, താപനില വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നത് സങ്കീർണ്ണമായ ഘടനകളും ഉയർന്ന CG ഉള്ളടക്ക ടെംപ്ലേറ്റുകളും വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ സഹായിക്കുന്നു;
ബി.പ്രൈമറിൻ്റെ Tm മൂല്യത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി ഒപ്റ്റിമൽ അനീലിംഗ് താപനില ക്രമീകരിക്കേണ്ടതുണ്ട്, കൂടാതെ റിയൽ ടൈം PCR ഉപകരണത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നൽ ശേഖരണത്തിനായി ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ സമയം തിരഞ്ഞെടുക്കുക.
കുറിപ്പുകൾ
നിങ്ങളുടെ ആരോഗ്യവും സുരക്ഷയും ഉറപ്പാക്കാൻ ആവശ്യമായ പിപിഇ, അത്തരം ലാബ് കോട്ടും കയ്യുറകളും ധരിക്കുക!
