2×PCR മാസ്റ്റർ മിക്സ് (ഡൈ ഇല്ലാതെ)
PCR Master Mix എന്നത് Taq DNA പോളിമറേസ്, dNTP മിക്സ് MgCl2, ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്ത ബഫർ എന്നിവയുൾപ്പെടെ ഉപയോഗിക്കാൻ തയ്യാറുള്ള ഒരുതരം പരമ്പരാഗത PCR പ്രീമിക്സ്ഡ് സൊല്യൂഷനാണ്.പ്രതികരണ സമയത്ത്, ആംപ്ലിഫിക്കേഷനായി പ്രൈമറും ടെംപ്ലേറ്റും മാത്രമേ ചേർക്കാൻ കഴിയൂ, ഇത് പരീക്ഷണത്തിൻ്റെ പ്രവർത്തന ഘട്ടങ്ങളെ വളരെ ലളിതമാക്കുന്നു.ഈ ഉൽപ്പന്നത്തിൽ മികച്ച സ്റ്റെബിലൈസറുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു കൂടാതെ 4℃ താപനിലയിൽ 3 മാസത്തേക്ക് സൂക്ഷിക്കാം.PCR ഉൽപ്പന്നത്തിന് 3′-dA പ്രോട്രഷൻ ഉണ്ട്, കൂടാതെ T വെക്ടറിലേക്ക് എളുപ്പത്തിൽ ക്ലോൺ ചെയ്യാനും കഴിയും.
സംഭരണ വ്യവസ്ഥകൾ
ഉൽപ്പന്നം -25℃~ -15℃ രണ്ട് വർഷത്തേക്ക് സൂക്ഷിക്കണം.
സ്പെസിഫിക്കേഷനുകൾ
ഫിഡിലിറ്റി (വേഴ്സസ്.ടാഖ്) | 1× |
ചൂടുള്ള തുടക്കം | No |
ഓവർഹാംഗ് | 3′-എ |
പോളിമറേസ് | ടാക്ക് ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് |
പ്രതികരണ ഫോർമാറ്റ് | സൂപ്പർമിക്സ് അല്ലെങ്കിൽ മാസ്റ്റർ മിക്സ് |
പ്രതികരണ വേഗത | സ്റ്റാൻഡേർഡ് |
ഉൽപ്പന്ന തരം | PCR മാസ്റ്റർ മിക്സ് (2×) |
നിർദ്ദേശങ്ങൾ
1.പ്രതികരണ സംവിധാനം
ഘടകങ്ങൾ | വലിപ്പം (μL) |
ടെംപ്ലേറ്റ് ഡിഎൻഎ | അനുയോജ്യം |
പ്രൈമർ 1 (10 μmol/L) | 2 |
പ്രൈമർ 2 (10 μmol/L) | 2 |
പിസിആർ മാസ്റ്റർ മിക്സ് | 25 |
ddH2O | 50 വരെ |
2.ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പ്രോട്ടോക്കോൾ
സൈക്കിൾ ഘട്ടങ്ങൾ | താപനില (°C) | സമയം | സൈക്കിളുകൾ |
പ്രീ-ഡീനാറ്ററേഷൻ | 94 ℃ | 5 മിനിറ്റ് | 1 |
ഡീനാറ്ററേഷൻ | 94 ℃ | 30 സെ | 35 |
അനീലിംഗ് | 50-60 ℃ | 30 സെ | |
വിപുലീകരണം | 72 ℃ | 30-60സെക്കൻഡ്/കെബി | |
അന്തിമ വിപുലീകരണം | 72 ℃ | 10 മിനിറ്റ് | 1 |
കുറിപ്പുകൾ:
1) ടെംപ്ലേറ്റ് ഉപയോഗം: 50-200 ng ജീനോമിക് ഡിഎൻഎ;0.1- 10 ng പ്ലാസ്മിഡ് ഡിഎൻഎ.
2) എംജി2+ഏകാഗ്രത: മിക്ക PCR പ്രതികരണങ്ങൾക്കും അനുയോജ്യമായ 3 mM MgCl2 ഈ ഉൽപ്പന്നത്തിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.
3) അനീലിംഗ് താപനില: പ്രൈമറുകളുടെ സൈദ്ധാന്തിക Tm മൂല്യം പരിശോധിക്കുക.അനീലിംഗ് താപനില പ്രൈമറിൻ്റെ സൈദ്ധാന്തിക മൂല്യത്തേക്കാൾ 2-5 ℃ ആയി സജ്ജീകരിക്കാം.
4) വിപുലീകരണ സമയം: തന്മാത്രാ തിരിച്ചറിയലിനായി, 30 സെക്കൻഡ്/കെബി ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.ജീൻ ക്ലോണിംഗിന്, 60സെക്കൻ്റ്/കെബി ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
കുറിപ്പുകൾ
1.നിങ്ങളുടെ സുരക്ഷയ്ക്കും ആരോഗ്യത്തിനും വേണ്ടി, പ്രവർത്തനത്തിനായി ലാബ് കോട്ടുകളും ഡിസ്പോസിബിൾ കയ്യുറകളും ധരിക്കുക.
2.ഗവേഷണ ഉപയോഗത്തിന് മാത്രം!